Презентация "Лабораторная диагностика малярии" – проект, доклад

Лабораторная диагностика малярии

Основывается на данных:

Эпидемиологического и географического анамнеза; Клинических проявлений болезни; клинический диагноз, предположительный Результатов лабораторного исследования; окончательный диагноз видовой формы

Лабораторная диагностика

2 метода: Паразитологический. Ведущий метод окрашенных препаратов крови по Романовскому - Гимза, тонкого мазка и толстой капли. Обнаружение бесполых и половых форм возбудителя при микроскопическом исследовании крови, что возможно только в период его развития в эритроците. Оба метода, имеют свои преимущества и недостатки, являются взаимодополняющими. Иммунологический. Подтверждением служит обнаружение в препарате крови любых стадий паразитов, развивающихся в эритроцитах: Трофозоитов (молодых/взрослых); Шизонтов (незрелых/зрелых); Половых форм; Гаметоцитов (мужских/женских). внеэртроцитарные стадии: Мерозоиты (существуют в плазме крови короткое время, в препарате обнаруживаются редко).

Микроскопия

Подготовка предметных стекол; Приготовление препаратов, их окраска; Собственно микроскопия.

1. Подготовка предметных стекол

В настоящее время выпускают специальные стекла не требующие предварительной обработки. Предметные стекла, не бывшие в употреблении: Моют в мыльном растворе Помещают в сосуд с водопроводной водой, меняя 6-7 раз Вытирают х/б тканью Помещают в смесь Никифорова (спирт-эфирная смесь, из расчета 1 мл на 1 стекло), до употребления. Либо, извлечь стекла через сутки, высушить х/б тканью и завернуть в чистую бумагу. Предметные стекла, бывшие в употреблении: Иммерсионное масло удаляют эфиром Заливают мыльным раствором, отмывая тряпочкой Важно! Во время манипуляций с предметными стеклами их нужно брать так, чтобы не касаться пальцами поверхности стекла.

2. Приготовление препаратов крови

Кровь берется с соблюдением правил асептики из 2-4 пальца левой руки. Кожу протирают 70° этиловым спиртом, первую выступившую каплю крови вытирают сухой ватой, удаляя остатки спирта, которые могут способствовать фиксации крови в препарате. Важно! Кожа в месте прокола должна быть максимально чистой, т.к. попавшие в препарат МО могут быть причиной диагностических ошибок.

Тонкий мазок

Не должен доходить ни до конца, ни до краев предметного стекла, на котором он делается Диаметр капли не более 2-3 мм Предметное шлифованное стекло, которым делается мазок, должно быть уже стекла, на которое наносят мазок, угол последнего 45° Маркировка (ф.и., дата взятия) Фиксация в 96° этиловом спирте (20-30 мин) Окрашивание

Толстая капля

На предметное стекло наносят каплю крови диаметром 5-10 мм, следят, чтобы в кровь не попал спирт, так как она может зафиксироваться и при последующем окрашивании препарата не произойдет нужного гемолиза. Каплю крови размазывают иглой или углом предметного стекла в кружок или квадрат. Либо сначала готовят мазок толще обычного, пока он не высох, на него наносят две капли, которые по влажному мазку растекаются. Высыхание Маркировка при помощи дополнительной полоски крови Окрашивание

2. Приготовление тонкого мазка и толстой капли

1—6—.этапы приготовления тонкого мазка; 7, 8, 9 — неправильно приготовленные мазки; 10—12—разные способы приготовления толстой капли.

Дефекты тонкого мазка

Приготовление рабочего раствора краски

Окрашивание азур-эозиновым красителем по Романовскому-Гимзе. Концентрация раствора по стандартной методике составляет 1-2 капли краски на 1 мл раствора, предварительно проверенной на наличие в ней азура. Под микроскопом в мазке : Эритроциты имеют розовый с фиолетовым оттенком цвет Лейкоциты с фиолетовыми ядрами (у гранулоцитов хорошо определяется зернистость) Тромбоциты темно-розового, рубинового цвета Ядра паразитов окрашены примерно в тот же цвет, что и тромбоциты Продолжительность окрашивания толстых капель 15-30 мин., мазков – 40-45 мин. После препарат промывают слабой струей воды и высушивают на воздухе. Важно! В качестве растворителя краски используют буферный раствор рН=7,0 - 7,2. Толстую каплю не фиксируют , эритроциты должны отсутствовать (кроме остатков незрелых и пораженных паразитами)

Дефекты приготовления и окраски препаратов крови. Способы их устранения

Пораженные паразитами эритроциты