Презентация "Клинический анализ кала" – проект, доклад

Клинический анализ кала

Химическое исследование

Определение pH Определение скрытой (не видимой глазом) крови Определение билирубина Определение стеркобилина Определение белка Определение лейкоцитов*

Преаналитический этап

В лабораторию доставляют теплый свежевыделенный утром кал, собранный в чистую сухую желательно стеклянную посуду. Для этого из нескольких участков испражнений шпателем берут 5–10 г кала без примеси воды и мочи. Если невозможно исследовать кал сразу после доставки в лабораторию, его хранят в специальном холодильнике при температуре +3–+50С, но не более 8–10 часов.

Диета Певзнера: Основана на принципе максимальной пищевой нагрузки для здорового человека. Она является обычным пищевым рационом здоровых людей: 400 г белого и черного хлеба 250 г мяса жареного куском 100 г масла 40 г сахара Картофель, каши,салаты Калорийность достигает 3250 ккал

Диета Шмидта: Щадящая, лечебная диета. 1-1,5 л молока 2-3 яйца всмятку 125 г слабообжаренного рубленного мяса 200-250 г картофельного пюре 100 г белого хлеба 50 г масла Общая калорийность 2250 ккал

Следует помнить, что перед исследованием необходимо отменить прием некоторых медикаментов, влияющих на внешний вид испражнений, результаты микроскопического исследования или усиливающих перистальтику кишечника (все слабительные средства, включая касторовое и вазелиновое масло, препараты висмута, железа, бария, ваготропные и симпатикотропные средства и препараты, вводимые в ректальных свечах, приготовленных на жировой основе).

Исследование кала на наличие так называемой скрытой крови, являющейся признаком кровотечения из органов желудочно-кишечного тракта, требует обязательной подготовки пациента в течение 2–3 дней. Отменяют продукты и медикаменты, в которых содержатся вещества, которые, так же как и кровь, могут катализировать химические реакции, направленные на обнаружение скрытой крови.

Приготовление каловой эмульсии

Небольшое количество фекалий (размером с лесной орех) поместите в пластиковую центрифужную пробирку и, постепенно добавляя дистиллированную воду или физиологический раствор, разотрите стеклянной палочкой до консистенции «густого сиропа» (разведение 1:2 – 1:8 в зависимости от характера фекалий) жидкий кал не разводить.

Определение pH

Для определения реакции кала используют лакмусовую бумагу, которая при соприкосновении с каловыми массами изменяет свой цвет в зависимости от величины рН. Красную и синюю полоски лакмусовой бумаги смачивают в дистиллированной воде и прикладывают к различным местам поверхности испражнений. Через 2–3 минуты учитывают результат реакции, используя следующие правила :

1. при кислой реакции кала синяя лакмусовая бумага краснеет, а красная не изменяет своего цвета; 2. при щелочной реакции кала красная лакмусовая бумага синеет, а синяя не изменяет своего цвета; 3. при нейтральной реакции кала обе лакмусовые бумаги сохраняют свой прежний цвет. В норме при обычном смешанном питании кал имеет нейтральную или слабощелочную реакцию.

Реакция кала зависит преимущественно от жизнедеятельности микробной флоры кишечника. Усиление процессов бактериального разложения белков (гниения) сопровождается образованием аммиака, придающего каловым массам щелочную реакцию, а усиление процессов брожения — выделением СО2, органических кислот и сдвигом рН в кислую сторону.

Определение скрытой крови (бензидиновая проба, реакция Грегерсена)

Принцип: в присутствии гемоглобина крови бензидин реагирует с перекисью водорода с образованием в течение первых 2 минут соединений, окрашенных в зеленый, сине-зеленый или синий цвет. Интенсивность окраски пропорциональна количеству крови в кале.

Приготовление 3% раствора перекиси водорода Растворить 3 таблетки гидроперита в 50 мл дистиллированной воды. Раствор стабилен при хранении в посуде из темного стекла и температуре 2-8 С в течении 3 месяцев. Приготовление раствора бензидина Перед употреблением немного бензидина (~500 мг) растворяют в 5 мл 50% уксусной кислоты до полного растворения. Раствор годен к употреблению, нестойкий. Ход определения Неразведенный кал наносят толстым слоем на предметное стекло, добавляют 2-3 капли раствора бензидина в уксусной кислоте и столько же перекиси водорода. Перемешивают стеклянной палочкой. Положительная реакция на кровь дает зеленое или сине-зеленое окрашивание в течение первых 2 мин. Окрашивание, наступившее позже, чем через 2 мин, не учитывают.

Определение билирубина

Принцип: билирубин, поступающий в кишечник с желчью, под влиянием кишечной флоры восстанавливается, в результате чего образуется уробилин (стеркобилин) - нормальный пигмент кала и уробилиноген - продукт более полного восстановления. Билирубин под действием реактива Фуше превращается в зеленый биливердин; интенсивность окраски пропорциональна количеству билирубина в кале.

Приготовление эмульсии кала: кусочек кала помещают в фарфоровую ступку и растирают в небольшом количестве дистиллированной воды или изотоническим растворе хлорида натрия. Эмульсию кала поместить в 2 пробирки по 1-2 мл, в опытную пробирку добавить по каплям реактив Фуше (объем реактива не должен быть больше эмульсии кала). В присутствии билирубина появляется зеленое или зеленоватое окрашивание. Сравнить опытную и контрольную окраску в проходящем свете.

Обнаружение в кале билирубина указывает на патологию: быструю эвакуацию пищи из кишечника, тяжелый дисбактериоз (отсутствие нормальной бактериальной флоры в толстой кишке, подавление нормальной микрофлоры под действием длительного приема антибактериальных средств).

Определение стеркобилина

Принцип: Стеркобилин взаимодействует с уксуснокислым цинком в присутствии раствора Люголя с образованием соединений, дающих зеленую флюоресценцию.

Ход реакции: разбавить раствор Люголя дистиллированной водой в соотношении 1:1. Эмульсию кала внести в пробирку в количестве 1-2 мл, добавить 1-2 мл раствора уксуснокислого цинка (предварительно взболтать) и 1 каплю рабочего раствора Люголя. Полученную смесь профильтровать в стеклянную пробирку, при наличии стеркобилина (положительнаяреакция) раствор дает зеленую флюоросценцию, видную на темном фоне

Определение белка

В каловых массах здорового человека белка нет. Положительная реакция на белок свидетельствует о наличие воспалительного процесса, слизи, непереваренного пищевого белка или кровотечении. Реакция Трибуле-Вишнякова основана на осаждении белка и муцина под действием реактивов реакции с выпадением осадка в виде хлопьев и просветлением эмульсии кала в пробирке.

Определение белка тест-полосками Тест высокочувствителен на белок и реагирует на его присутствие в кале при такой низкой концентрации, как 0,10 – 0,15 мг/мл каловой эмульсии. Оценка: изменение окраски реагентного поля наступает сразу после нанесения материала на полоску и сравнивается с образцом окрашенных зон на контейнере через 60 с.

Виды реагентных полосок

АльбуФАН – определение рН и белка ГемоФАН – определение гемоглобина и эритроцитов (скрытая кровь) ИктоФАН – обнаружение билирубина и стеркобилина ОктаФАН – комплексные полоски (+лейкоциты) Абрис + : Диахим-набор для клинического анализа кала