Презентация "Кампилобактерии" по медицине – проект, доклад

КАМПИЛОБАКТЕРИОЗЫ

СПбГУ 2015г.

это острое зооантропонозное инфекционное заболевание, вызываемое патогенными для человека видами бактерий рода Campylobacter, характеризующаяся симптомами интоксикации, преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта; у маленьких детей и ослабленных людей нередко протекающая в виде септического процесса.

Кампилобактериоз

Таксономия рода Campylobacter (cем. Campylobacteraceae)

C. jejuni (90-98% кишечн.) C. coli C. fetus (внекишечн.) C. lari

C. jejuni (90-98% кишечн.) C. coli C. lari (редко внекишечн.) C. fetus (ветеренария)

Эпидемиология кампилобактериоза

Кампилобактерии обнаруживаются у всех видов диких и домашних зверей и птиц, многие из которых являются их естественными резервуарами (сельскохозяйственные животные, домашние животные, дикие городские птицы и грызуны), больные люди . Основной путь передачи инфекции - пищевой (сырое молоко, битая птица, говядина, свинина), дополнительные - водный (речная и морская вода, загрязненная испражнениями животных) и бытовой (нарушения санитарно-гигиенических норм при уходе за больными людьми и животными, а также при кулинарной обработке мясных продуктов). Кампилобактериозу свойственна выраженная летняя сезонность с почти полным отсутствием заболеваемости в зимние месяцы. Чаще заболевание регистрируется в виде спорадических случаев («диарея путешественников»), изредка - в виде более или менее крупных вспышек. После перенесенного заболевания у людей, не леченных антибиотиками, бактерии с испражнениями выделяются достаточно долго, в течение 2- 5 нед., а иногда до 10 нед.

Способы заражения и источник инфекции Campylobacter jejuni

Kathryn T. Young, Lindsay M. Davis & Victor J. DiRita Campylobacter jejuni: molecular biology and pathogenesis//Nature Reviews Microbiology 2007.-№5, 665-679

Клинико-экологическая характеристика патогенных для человека видов Campylobacter

Распространенность кампилобактериозов

Морфология Campylobacter spp.

Гр(-), тонкие, спирально изогнутые палочки размером 0,2-0,3 х 0,5-5,0, иногда до 8,0 мкм. Образуют один полный (или чуть больше) виток спирали, могут быть С- или S-образной формы или напоминать крылья чайки при соединении двух клеток в короткую цепочку. В старых культурах клетки могут иметь кокковидную или гиперспирализованную форму.

Типичная форма кампилобактеров: S-образная (а) и спиралевидная (б)

а б

Имеют 1 или 2 (иногда до 5) полярно расположенных жгутика, обеспечивающих им высокую подвижность со стремительным штопорообразным или винтообразным поступательным движением.

Характерное расположение клеток Campylobacter в мазке («крылья летящей чайки»)

Campylobacter fetus – возбудитель внекишечного кампилобактериоза

Campylobacter jejuni

EM at different magnifications (A and B) of cells of strain G1 treated with Alcian blue. Capsulated cells with fibrilla-like structures are also shown (C). CA, capsule; F, fibrillae.

Karlyshev AV, McCrossan MV, Wren BW. Demonstration of polysaccharide capsule in Campylobacter jejuni using electron microscopy. Infect Immun. 2001 Sep;69(9):5921-4.

Scanning electron micrographs of C. jejuni NCTC 11351 in a medium having an osmolality between 251 and 257 mosmol, showing predominantly rodlike cells (A), and in a medium having an osmolality of 111 to 117 mosmol, showing predominantly coccoid cells (B), after 18 h of incubation at 42°C. Bars = 1 μm.

Reezal A, McNeil B, Anderson JG. Effect of low-osmolality nutrient media on growth and culturability of Campylobacter species. Appl Environ Microbiol. 1998 Dec;64(12):4643-9.

Среды для культивирования

Для культивирования кампилобактерии чаще используют специальные питательные среды, в основу которых положены среды для выделения бруцелл, но с добавлением веществ, повышающих аэротолерантность кампилобактерии и снижающие редокс-потенциал среды (кровь, тиогликолат натрия, метабисульфит натрия, пируват натрия, сульфат Fe2+). Обычно используют мясные, печеночные, кровяные среды, часто в них добавляют антибиотики (новобиоцин, циклогексамид, бацитрацин, триметоприм) для подавления сопутствующей микрофлоры. Рост кампилобактерий наблюдается через 2-4 сут. На жидких питательных средах наблюдается диффузное помутнение с трудно разбиваемым выраженным осадком. На полужидких средах они вырастают в виде диффузного мутного кольца толщиной 1-4 мм под поверхностью среды. Если кампилобактерии растут в условиях строгого анаэробиоза, отмечается помутнение всей среды.

Колонии Campylobacter jejuni

На плотных средах с кровью кампилобактерии образуют два типа колоний: округлые неправильной формы, с ровными краями, диаметром 2-8 мм, бесцветные или светло-серые, прозрачные, гомогенные; при длительном культивировании могут приобретать серебристо-матовый оттенок; колонии правильной округлой формы, с ровными краями и диаметром 1-2 мм, с блестящей выпуклой поверхностью, прозрачные, гомогенные; в старых колониях центр более плотный, чем периферия, и может образовываться желтоватый пигмент. Консистенция колоний невязкая, зона гемолиза отсутствует.

Биохимические и культуральные свойства

Микроаэрофилы 3-15% О2, 5-10% СО2 и 85% N2 от 37 до 42°С (термофилы) искл. C. fetus Оптимальная рН 7 O/F тест -/- Оксидаза+ Каталаза+ (есть каталаза (-) С. sputorum и С. concisus) Реакция Фогеса-Проскауэра -

АГ свойства

Имеют О-, Н- и К-антигены. С. jejuni и С. coli, наиболее часто вызывающие заболевания у человека, серологически гетерогенны (описано 55 серогрупп, различающихся по термостабильному О-антигену). Штаммы, выделенные от человека, дают реакцию агглютинации только с сывороткой от людей, а сывороткой от иммунизированных животных они не агглютинируются. (формирование штаммов, специфичных для человека).

Факторы патогенности

Адгезины Подвижность Гиалуронидазы, нейроменидазы ЛПС Энтеротоксин (холероподобный) Цитотоксин (повреждающий слизистую оболочку толстой кишки у человека) Гемолизины

Cell-distending activity of recombinant C. jejuni CDT subunits in CHO-K1 cells. CHO-K1 cells were left untreated (A) or treated with C. jejuni CDT holotoxin (CdtA, CdtB, or CdtC; 200 nM each subunit) (B) for 48 h at 37°C. The cells then were examined under an inverted optical microscope to assess the effects of CDT intoxication. Scale bar, 100 μm. The cell cycle distribution was based on the DNA content, which was determined by flow cytometry. The percentages of cells in the G0/G1, S, and G2/M phases of the cell cycle are indicated below the insets. The results represent one of three independent experiments

Lin CD, Lai CK, Lin YH, Hsieh JT, Sing YT, Chang YC, Chen KC, Wang WC, Su HL, Lai CH. Cholesterol depletion reduces entry of Campylobacter jejuni cytolethal distending toxin and attenuates intoxication of host cells. Infect Immun. 2011 Sep;79(9):3563-75. Epub 2011 Jul 5.

High resolution FESEM of C. jejuni-induced filopodia formation and invasion. (A) Infection of GD25 knockout cells with wt C. jejuni 81-176 (yellow arrows) for 6 hours revealed bacterial attachment to the cell surface with short microspikes (green arrowheads) present, but membrane dynamics events or invasion were rarely seen. Similar observations were made with infected fibronectin-/- or FAK-/- cells. (B) Infecting C. jejuni in wt cells were regularly associated with long filopodia (blue arrows) membrane ruffling (red arrows), as well as elongated microspikes (green arrowheads).

Krause-Gruszczynska M, Boehm M, Rohde M, Tegtmeyer N, Takahashi S, Buday L, Oyarzabal OA, Backert S. The signaling pathway of Campylobacter jejuni-induced Cdc42 activation: Role of fibronectin, integrin beta1, tyrosine kinases and guanine exchange factor Vav2. Cell Commun Signal. 2011 Dec 28;9:32.

Слизистая оболочка толстой кишки при кишечном кампилобактериозе. Увеличение Х 100

Proposed mechanisms of pathogenesis used by emerging Campylobacter species to colonize the intestinal tract or to spread to systemic sites.

Si Ming Man The clinical importance of emerging Campylobacter species//Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology 2011.-№8, 669-685

Устойчивость

При комнатной и при пониженной температурах резистентность кампилобактерии к действию факторов внешней среды весьма высока: в пищевых продуктах, водопроводной и сточных водах, молоке, моче, испражнениях они могут сохранять жизнеспособность в течение 1-5 нед. Кампилобактерии очень чувствительны к нагреванию свыше 50 °С, действию прямого солнечного и ультрафиолетового света и воздуха, высыханию, низким и высоким значениям рН среды, чувствительны к действию дезинфицирующих веществ в рабочих концентрациях.

Течение кампилобактериозов:

Инкубационный период 1-10 дней, чаще 1-5 дней. Начало заболевания чаще острое, реже - подострое. Обычно наблюдаются умеренно выраженная интоксикация и диарея (до 10-20 раз в сутки), боли в нижней части живота. В половине случаев отмечается наличие крови в испражнениях, реже - обезвоживание. Формы заболевания: 1) гастроинтестинальная форма (кишечный кампилобактериоз) с преимущественным вовлечением различных отделов ЖКТ в виде энтерита (4-12%), энтероколита, гастроэнтероколита и колита (81-93%); 2) генерализованная форма (септическая); 3) хроническая форма; 4) субклиническая форма (бактерионосительство) — до 1 %.

Осложнения кампилобактериозов

бактериемия (наличие бактерий в крови), гепатит, панкреатит (инфекции печени и поджелудочной железы, соответственно) и самопроизвольный аборт, регистрируются с разной степенью частоты. Постинфекционные осложнения - реактивный артрит (болезненное воспаление суставов, которое может продолжаться несколько месяцев) и неврологические расстройства, подобная полиомиелиту форма паралича, которая может приводить к дыхательной и тяжелой неврологической дисфункции или смерти в незначительном числе случаев.

ВОЗ. Информационный бюллетень № 255. Октябрь 2011 г.

Диагностика

железо-эритритный кровяной агар (ЖЭКА) среда Мюллер-Хинтона РА (АГ) РСК (АГ) РНГА (AT) РИФ (AT) Реакция иммунной сорбции (AT, меченные ферментами) ПЦР

Лечение:

Препаратами выбора являются макролиды (эритромицин, азитромицин) и фторхинолоны (ципрофлоксацин, норфлоксацин, офлоксацин). Внекишечные формы чаще лечат: канамицином, тетрациклином, гентамицином, ампициллином. Кампилобактерии малочувствительны к пенициллину, нечувствительны к сульфаниламидным препаратам, триметаприму. Специфической профилактики не разработано!